[Microbiologie] Identification D'une Galerie Api 20Ne
Thursday, 1 August 2024- Refermer la boîte d'incubation et la placer dans l'étuve à 37° C pendant 24 heures. Après incubation, la lecture de ces réactions se fait à l'aide du tableau de lecture ci-dessous: Résultat + Résultat - Avec le catalogue analytique: Les tests sont regroupés en groupe de 3, et une valeur (1, 2 ou 4) est indiquée pour chacun. Additionner à l'intérieur de chaque groupe les nombres correspondants aux tests positifs. On obtient un nombre 7 chiffres qui sert de code d'identification. Avec un logiciel d'identification DATE: Modifications apportées 2009_04_08 Création du texte Lycée Paul Éluard Avenue Jean Moulin 93206 SAINT DENIS PROCÉDURE RÉF: M3002 Galerie API20NE Création date: 2010_04_2010 Version: 1. 2 Modification: date Rédacteur:DIAWARA Gatta Vérificateur: Approbatrices: Date: 2010_04_06 Date: Visa 1. OBJET La galerie API 20 NE se compose d'une galerie constituée de 20 microtubes contenant milieux et substrats sous forme déshydratée. Les tests conventionnels sont inoculés avec une suspension bactérienne saline qui reconstitue les milieux.
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Exercice: procéder à l'identification de ces deux levures, après mise en oeuvre de la galerie API 20C Aux
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Proposer une ou plusieurs molécules à ajouter pour obtenir une croissance sur ce milieu. En déduire une définition de l'auxanogramme. Auxanogramme: macrométhode Matériau: culture pure de la levure isolée du prélèvement vaginal, sur gélose Sabouraud + chloramphénicol. - Réaliser une suspension en eau physiologique stérile de turbidité équivalente à celle d'un étalon de turbidité 3 McFarland (correspond à plusieurs anses de culture) -Incorporer 1 mL de cette suspension dans 20 mL de gélose pour auxanogramme maintenue en surfusion et ramenée à température compatible avec le survie des levures. Homogénéiser. -Couler immédiatement la gélose inoculée et laisser solidifier le milieu. Remarque: on peut aussi réaliser un étalement en surface de V suspension = 0, 1 mL -Imprégner successivement et faiblement (la charge en molécule carbonée ne doit pas être importante) autant de disques de papier stériles avec 25 µL de chacun des glucides à tester: GLU cose, GLY cérol, 2K eto G luconate, ARA binose, ADO nitol, INO sitol, M éthy- D-G lycoside, N-A cétyl- G lycosamine, MAL tose, M e L e Z itose, RAF finose.
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Les réactions produites durant la période d'incubation se traduisent par des virages colorés spontanés ou révélés par l'addition de réactifs. Les tests d'assimilation sont inoculés avec un milieu minimum et les bactéries cultivent seulement si elles sont capables d'utiliser le substrat correspondant. La lecture de ces réactions se fait à l'aide du Tableau de lecture et l'identification est obtenue à l'aide du tableau d'identification. 2. DÉMARCHE · Préparation de la galerie: Mettre de l'eau distillée sur le fond de la boîte, toutes les alvéoles doivent être remplies, éliminer ensuite l'excès d'eau Déposer stérilement la galerie dans la boîte d'incubation. · Préparation de la suspennsion: Faire une suspension bactérienne, dans une ampoule de NaCl 0, 85% Medium ou dans un tube d'eau distillée stérile, de turbidité égale à celle de l'étalon 0, 5 Mcfarland. · Inoculation de la galerie: Remplir les tubes (et non les cupules) des tests NO3 à PNPG avec la suspension précédente. Eviter la formation de bulles.