Dosage Des Glucides Par Spectrophotométrie De

Thursday, 11 July 2024

Le dosage du glucose par le DNS est un dosage colorimétrique du glucose. Principe [ modifier | modifier le code] On utilise les propriétés réductrices du glucose. À chaud et en milieu alcalin, il y a réduction de l'acide 3, 5-dinitrosalycilique ou DNS (aussi appelé acide 2-hydroxy-3, 5-dinitrobenzoïque) qui joue le rôle d' oxydant, le glucose étant le réducteur. Réaction de réduction de l'acide 3, 5-dinitrosalicylique en acide 3-amino-5-nitrosalicylique (aussi appelé acide 3-amino-2-hydroxy-5-nitrobenzoïque): Le glucose, quant à lui, est oxydé en divers produits d'oxydation: Glc → produits d'oxydation + n e – L'acide 3-amino-5-nitrosalicylique est un composé rouge. Cette réaction n'est pas stœchiométrique: il n'y a pas de bilan d' oxydoréduction. L'intensité de la coloration rouge est proportionnelle à la concentration de l' ose si l'on opère dans des conditions physico-chimiques constantes. Les droites d'étalonnage ne passent pas toujours par l'origine. Dosage des glucides par spectrophotométrie en. Cette méthode n'est pas applicable au dosage d'un mélange complexe de glucides réducteurs.

1. Dosage des glucides par spectrophotométrie en
2. Dosage des glucides par spectrophotométrie et
3. Dosage des glucides par spectrophotométrie un

Dosage Des Glucides Par Spectrophotométrie En

L'azote est ensuite libéré sous forme d'ammoniac, par l'ajout de soude concentrée, puis distillé dans une solution d'acide borique indicateur. Un dosage par titration permet de déterminer la quantité d'ammoniac. Le tampon borique vert, en excès (dosage en retour), se colore en rose en présence d'acide sulfurique. Les résultats sont exprimés en mg d'azote par g de matière sèche.

Dosage Des Glucides Par Spectrophotométrie Et

L'extraction se fait à partir de 10 mg de poudre sèche dans 1, 5 mL d'acétone à 80%. Après agitation, les échantillons sont centrifugés à 14000 g pendant 5 min. Les teneurs en chlorophylles a et b sont calculées à partir de la lecture des absorbances à 663 nm (A663) et à 642 nm (A642) contre un blanc contenant uniquement de l'acétone. Dosage des glucides par spectrophotométrie cours. Les concentrations en pigment sont données par les équations suivantes: - Chl a (µg/mL) = (12, 58 x A663) - (2, 93 x A642) - Chl b (µg/mL) = (21, 14 x A642) - (5, 09 x A663) Les résultats sont ensuite exprimés en mg de pigment par g de matière sèche. III. 9 Extraction et dosage de l'azote soluble, insoluble et total (Kjeldahl) L'azote insoluble et l'azote total sont dosés suivant le principe de la méthode de Kjeldahl, dont est déduite la teneur en azote soluble. Les composés azotés des échantillons secs en poudre (50 mg) sont minéralisés à l'aide d'acide sulfurique concentré, contenant une concentration élevée de potassium (ce qui permet d'élever le point d'ébullition du mélange) et en présence de sélénium (catalyseur), pour former du sulfate d'ammonium.

Dosage Des Glucides Par Spectrophotométrie Un

Définition des polysaccharides totaux: Les polysaccharides sont des polymères de la famille des glucides. On les appelle également: Glycanes, Polyosides, Polyholosides, Glucides complexes. Ils sont constitués de plusieurs oses, liés entre eux par des liaisons osidiques. Les polysaccharides les plus répandues du règne végétal sont la cellulose et l'amidon, deux polymères du glucose. Les exopolysaccharides sont des métabolites excrétés par des microbes, champignons et vers jouant un rôle majeur dans la formation et la conservation des sols et de l'humus. Dosage des glucides par spectrophotométrie un. Les polyosides, eux, sont utilisés comme additifs alimentaires sous forme de fibre (inuline) ou de gomme naturelle. Les polysaccharides sont des sucres complexes constitués par la polymérisation d'oses (monosaccharides). Un polysaccharide désigne des macromolécules formées par la polymérisation de glucides simples ou oses, des sucres. Il s'agit de biomolécules formées par l'union d'un grand nombre de monosaccharides. Les polysaccharides constituent une famille très importante de molécules souvent ramifiées et ont tendance à ne pas prendre de forma particulière (on les dit amorphes) et sont insolubles dans l'eau et n'ont pas de pouvoir sucrant.

III. 2 Dosage de l'amidon L'amidon est dosé selon la méthode décrite par Outlaw et Manchester (1979), sous la forme d'un excès de glucose issu de l'hydrolyse de l'amidon de l'échantillon par l'amyloglucosidase. L'extrait d'amidon soluble est ensuite utilisé à raison de 100 µL par essai. L'hydrolyse de l'amidon en glucose est effectuée dans un tampon d'acétate 0, 1 M à pH 4, 75 (volume final de 700 µL), pendant 2 h d'incubation à 55°C, après l'ajout de 200 µL d'une solution d'amyloglucosidase (EC 3. 2. 1. 3. de Aspergillus niger, 40, en suspension, Sigma) à 2 µ, préparée en solution tampon acétate 0, 1 M, pH 4, 75. Après une centrifugation de 5 min à 5000 g, le glucose obtenu est dosé sur une prise d'essai de 500 µL du surnageant par une méthode colorimétrique (Nguyen et al. 1990). Ce dosage utilise le système enzymatique glucose oxidase et peroxydase (GOD-POD) en présence d'orthodianisidine. C.4.2. Dosage par étalonnage spectrophotométrique - YouTube. Le GOD oxyde le glucose en acide gluconique avec formation de H2O2 et, celui-ci, sous l'action de la POD, oxyde l'orthodianisidine (incolore à l'état réduit et rose à l'état oxydé).